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無菌檢查與微生物檢查的一些問題解答

更新時間:2016-02-17   點擊次數(shù):2054次

1、問: 做無菌驗證時陽性對照菌是怎么加入的?可以在加完培養(yǎng)基后用無菌的注射器把菌液注入嗎?

:嚴格的說是要在zui后一遍沖洗液中加入陽性對照菌的,這主要是考量濾膜對于陽性菌的截留性~但是濾器如果可以提供濾膜對于陽性菌的充分截留的話在zui后的培養(yǎng)體系中加入陽性菌也是未嘗不可的. 如果供試品沒有抑菌作用,可以在加完培養(yǎng)基后用無菌的注射器把菌液注入,搖勻如果供試品有抑菌作用,正如安哥洛卡所講,在zui后一次沖洗液中加入陽性對照菌,搖勻,抽慮,加培養(yǎng)基. 無菌檢查,加入陽性的方法可以有許多種,可以根據(jù)個人的習慣。只是注意:1、避免人為污染。2、陽性菌加入數(shù)量,關鍵詞:陽性對照菌

2、問: 離心沉淀法的原理、操作和注意事項是什么?

:原理:利用沉降系數(shù)的差異將供試品和微生物進行分離;

操作:取規(guī)定量的供試液,3000/分離心20分鐘(供試液如有沉淀,先以500/分離心5分鐘,取全部上清液再離心),棄去上清液,留底部集菌液約2ml,加稀釋劑至原規(guī)定量.

注意事項:真菌由于沉降系數(shù)比較小, 500r/min離心5min,黑曲霉、白色念珠菌回收率為20%,因此其檢查不適宜用低速離心沉淀法.

關鍵詞:離心沉淀法

3、問: 穩(wěn)定性實驗的微生物及無菌檢查,是否每次都要做?

:;

原因: 實驗期內(nèi)可能會染菌;

滅菌后微生物并不是就*"死亡",有些成為碎片,這些碎片在一定的條件和時間下,可以自我修復而復活.

穩(wěn)定性的考察,也應包括藥品有效期的考察,在此期間所有的項目都應是合格的,無菌也是其中之一,如果在有效期內(nèi)無菌不合格,也可以說明該藥品存在一定的缺陷,至少,有效期有問題。

關鍵詞: 穩(wěn)定性實驗

4、問:眼部給藥制劑如何做衛(wèi)生學檢驗?

:液體制劑:無菌檢查;

半固體及固體制劑:微生物限度檢查

關鍵詞: 眼部給藥制劑

5、問:滴眼液的微生物限度為何進行無菌檢查?

: 滴眼劑產(chǎn)品系按照無菌工藝生產(chǎn)且終產(chǎn)品為滅菌產(chǎn)品,故其成品的微生物質量應要求統(tǒng)一為無菌;所以,滴眼劑產(chǎn)品的臨床合理用藥應與其衛(wèi)生標準要求一致,即將其微生物質量要求統(tǒng)一為無菌,顯然更為合理;

滴眼劑的微生物質量要求為無菌,是與各國藥典在滴眼劑要求上的統(tǒng)一,及對《中國藥典》此項規(guī)定合理性的補充及完善等方面看,滴眼劑成品的微生物質量要求統(tǒng)一為無菌具有必要性。

同時,中國已加入WTO,進出口藥品已有明確質量要求(在國外藥典中,眼用藥品都以無菌要求),同時臨床用藥更加合理與規(guī)范。

故現(xiàn)行藥典將滴眼劑的衛(wèi)生標準統(tǒng)一為強制性無菌要求。

關鍵詞: 滴眼液 無菌檢查

6、問:如何進行滅菌驗證?

: 可用生物指示劑進行驗證,

濕熱滅菌:濕熱脂肪芽孢桿菌孢子

干熱滅菌:枯草芽孢桿菌孢子

7、問:為何潔凈度沉降菌的檢查只用營養(yǎng)瓊脂?

: 玫瑰紅鈉培養(yǎng)基對細菌的生長有抑制作用,而營養(yǎng)瓊脂對于真菌的生長則沒有抑制作用,所以選用營養(yǎng)瓊脂作為培養(yǎng)基

營養(yǎng)瓊脂主要為培養(yǎng)細菌,而且培養(yǎng)時間是2,原因為細菌為原核生物,生長與繁殖的能力較霉菌等真核生物強,所以控制了細菌,霉菌等真菌也在一定程度上也得到了控制

廠家在制定自己的內(nèi)控標準時,可以同時對細菌和真菌進行控制.

關鍵詞:沉降菌

8、問: 微生物培養(yǎng)時間范圍如何界定?

: 含量測定所允許的誤差為±2%,如果照此限度,無菌培養(yǎng)時間為14*24小時/=336小時,它的2%6.72小時,前后共13.44小時;又加上無菌檢驗沒有必要達到含量測定所要求的精度,所以我們*可以在培養(yǎng)的第十四天的任何上班時間觀察結果下結論.微生物限度檢查培養(yǎng)時間分別為48小時及72小時, 它們的2%分別為0.96小時,1.44小時,即我們只能在準確培養(yǎng)時間的前后1~2小時內(nèi)計數(shù).

關鍵詞: 微生物培養(yǎng)時間

9、問:抗生素乳膏,需加聚山梨酯80、司盤、單硬脂酸甘油酯乳化,后離心集菌(離心后不分層),再薄膜過濾。但基質堵住膜孔,過濾速度非常慢,怎么辦?

答:1、可以用十六烷酸異丙酯萃取基質,使之分層,取水層進行薄膜過濾(回收率差)。

2、樣品加入吐溫-80,乳化(45度)-----薄膜過濾。

關鍵詞:抗生素乳膏、十六烷酸異丙酯、萃取、吐溫-80、乳化(45度)、薄膜過濾

10、問:陶瓦蓋作用及使用范圍

:陶瓦蓋的主要作用為防止菌落蔓延生長成片或發(fā)生重疊影響計數(shù),通常在在效價測定中使用,在微生物限度檢查中僅在易形成片狀菌某些劑型如蜜丸、水丸中使用.

關鍵詞:陶瓦蓋

11、問:如何根據(jù)消毒物品的特性確定合格的滅菌時間和溫度?

:一般情況下,含有糖分的培養(yǎng)基溫度需控制在1151520min,不含糖分的培養(yǎng)基溫度控制在1211520min,而含菌的培養(yǎng)基(使用過)溫度需控制在12130min左右 ,此外每次使用時,應放入必要的監(jiān)視指標。

關鍵詞:滅菌時間 溫度

12、問:如何減少培養(yǎng)基靈敏度下降引起的誤差? :目前大多數(shù)單位使用干粉培養(yǎng)基,使用較方便,但由于其極易吸潮,如存放不當出現(xiàn)凝塊,則其凝固性較差,應避免使用。新鮮配制的培養(yǎng)基應在2℃~20℃避光保存,但不得凍結,保存時間不得過2周。硫乙醇鹽流體培養(yǎng)基儲存過程中,若氧化還原層超過1/5,須經(jīng)水浴加熱煮沸10min方可使用,但只限一次。否則可使培養(yǎng)基中糖、微生 物和氨基酸受到破壞,影響質量

關鍵詞:培養(yǎng)基靈敏度

13、問:如何控制細菌的培養(yǎng)時間?

:不同的培養(yǎng)時間對樣品細菌總數(shù)計數(shù)結果的影響 樣品經(jīng)24h培養(yǎng)后,有的菌落很小,容易漏掉,培養(yǎng)48h后,菌落不但變大,而且還有很多新生長出來的菌落,培養(yǎng)72h后,菌落數(shù)增加不多,但菌落明顯變大,而且混雜的霉菌生長旺盛,影響結果的觀察計數(shù)。同時這也是一些樣品經(jīng)72h培養(yǎng)后細菌總數(shù)技術有明顯增加的一個原因。培養(yǎng)24h和培養(yǎng)48h計數(shù)結果有明顯差異,后者合格率明顯降低,所以在規(guī)定的培養(yǎng)環(huán)境下,應嚴格遵守培養(yǎng)時間,以便真實的反映出樣品中細菌總數(shù)的水平。

關鍵詞:細菌 培養(yǎng)時間

14、問:菌種保藏與管理應執(zhí)行哪些程序?

:菌種保藏與管理應有完整的程序,保藏的菌種必須具備該菌種的詳細歷史及有關資料。一般是首先填寫菌種卡片,登記菌種名稱編號,來源歷史,形態(tài)特征,生化與血清學鑒定,以及菌種傳代次數(shù)、zui宜培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件、保藏方法、貯存條件及保藏地址等

關鍵詞:菌種保藏與管理

15、問:青霉素酶的保存條件及溫度對其活性的影響 

:青霉素酶能夠在4℃保存6 個月以上活性不發(fā)生顯著改變。與同時采用的加入甘油或增加氯化鈉濃度保護酶活性的方法比較, 沒有顯著的不同;

溫度對青霉素酶的活性影響很大。55 ℃時對青霉素G呈現(xiàn)zui高水解活性, 隨著溫度的升高或降低, 酶水解活性逐漸下降。緩沖液pH 對酶活性存在一定的影響, zui適酸堿度為 pH 7.0 ,在應用本酶進行青霉素制劑無菌檢查等應用時, 需特別注意測試溫度及酸堿度的影響.

關鍵詞:青霉素酶 保存

16、問:標準滅菌時間

F0=Ft * 10(t-121)/10計算,F0要大于8,在160--170度是短時間就能做到的,為什么干熱滅菌要兩小時以上呢?

答:濕熱滅菌和干熱滅菌的效果是不同的, 飽和蒸汽的穿透性比干熱空氣穿透強得多,蒸汽冷凝時放出的潛熱傳給待滅菌品,使之升溫并使待滅菌品所帶的微生物尤其是表面的微生物發(fā)生水合作用, 從而加速了它們的死亡。所以在達到同樣滅菌效果的前提下,濕熱滅菌所需要的時間要短得多。

(公式 F0=Ft * 10(t-121)/10 只適合于濕熱滅菌 ,F0T=121℃及Z=10℃下的FT值。如果把121℃理解為“標準狀態(tài)”,那么F0可理解為“標準滅菌值”)

關鍵詞:滅菌時間、濕熱滅菌、干熱滅菌

 

17、問:驗證是不是要3批樣品的一次,還是一批樣品的3次,還是3次樣品3次得實驗?

答:1、驗證的目的,是要考察實驗方法的可行性(避免出現(xiàn)假陽性、假陰性),

2、在樣品的藥物組成、成份、給藥途徑一致的前提下,驗證時,“同一個批號的做3次”或“3個批號的各做一次”,均可。

關鍵詞:驗證、3次、1

18、問:做實驗的好習慣是什么?

答:1.實驗前后清潔洗手,完畢清理實驗現(xiàn)場,器皿洗凈歸原,儀器等電源關閉。 2.試劑、樣品標簽詳細準確,包括劑量,規(guī)格,時間,實驗人員等等;實驗記錄詳細準確,以便備查和分析。 3.提前分析實驗內(nèi)容及步驟,準備好全部的試劑及相應工具、儀器,不懂或者有疑問的步驟和地方問清楚,重點難點重點標出,做到心中有數(shù);實驗完畢及時分析。 4.科學計劃、合理分配時間,做到忙而不亂。實驗中仔細觀察試驗過程,及時記錄可疑或者需要注意的地方。 5.多讀文獻多與別人交流,開拓思路,改進方案,對于實驗的進展及方向做到一定的把握。

關鍵詞:做實驗、好習慣

19、問:限度檢查所用器皿用自來水洗后一定用純化水再洗嗎?

答:GMP認證中關于QC的規(guī)程中"分析用玻璃器皿清潔規(guī)程"要求如下

1.0目的 提供玻璃器皿的清潔方法的文件指導。 2.0范圍 化驗室部門所有玻璃器皿。 3.0責任 化驗室人員。 4.0程序 4.1 玻璃器皿每次使用后,使用者必須使其清潔并放于固定位置備用。 4.2 一般玻璃器皿清潔,用飲用水或去污劑洗滌后,器壁應不掛水珠,再用少量純化水沖洗器皿三次,放固定位置自然干燥。 4.3 定量分析用玻璃器皿(如滴定管;移液管等)清潔,先把器皿內(nèi)的水瀝掉,然后往其中加入洗液,浸泡一段時間,放掉洗液,用飲用水沖洗后,再用純化水沖洗三次,倒置自然干燥。 4.4 水分測定用的玻璃器皿清潔過程同12,清潔后置于105~107℃烘箱內(nèi)烘干。然后存放于干燥器中。

關鍵詞:限度檢查、器皿、純化水

20、問:潔凈室甲醛氣體熏蒸消毒驗證方案是什么?

答:1、 甲醛消毒方法

在所有的消毒液中甲醛zui常用。當相對濕度在65%以上、溫度在24~40℃時,甲醛氣體的消毒效果,但若采用過多的甲醛,會因聚合而析出白色粉未附在建筑物或設備表面。一般甲醛的消毒方法如下:

A:消毒前先用絲綢浸注射用水(純化水)擦洗房間建筑物和設備表面,然后用5%麝香草酚溶液噴酒或擦洗,靜置1小時后,再用絲綢浸注射用水(純化水)擦洗一次。

B:計算體積(包括房間及風管體積),按10ml/m3的比例準備濃度為36%的甲醛溶液(甲醛密度為1.1g/ml),按2~3g/m3的比例準備高錳酸鉀溶液。

C:在房間中放入試驗裝置,如不銹鋼培養(yǎng)皿支架;直徑90mm雙碟玻璃培養(yǎng)皿;枯草桿菌試紙,每張試紙上枯草桿菌數(shù)量為1*106個,每個培養(yǎng)皿中放2張試紙,1張做無菌試驗,1張做含菌數(shù)試驗。培養(yǎng)皿的數(shù)量應根據(jù)房間面積確定。

D:消毒流程:在不銹鋼容器中加入高錳酸鉀,用雙層紗布蓋住桶口,再倒入36%濃度的甲醛溶液 甲醛氣體擴散(約30min 啟動空調(diào)器讓甲醛氣體循環(huán)(約20min 關閉通風系統(tǒng),房間熏蒸消毒,不少于7hr 房間排氣,用新鮮空氣置換(約2hr 開啟空調(diào)系統(tǒng) 75%酒精噴酒環(huán)境。

E:質監(jiān)部門取樣培養(yǎng)。判斷標準:試紙內(nèi)枯草桿菌數(shù)量小于1*103個為合格。

F:取樣后用絲綢沾0.1%的新潔爾滅溶液擦洗機器表面;用0.1%新潔爾滅溶液或1%Germ Warfare溶液或75%酒精噴灑建筑物四周。0.1%新潔爾溶液與1%Germ Warfare溶液溶液每月輪換一次。

2、 氣體熏蒸滅菌后室內(nèi)環(huán)境中殘留量的測試

用甲醛氣體進行熏蒸滅菌后,需用全新空氣換氣若小時,由于甲醛的環(huán)境標準只有(1~2*10-6,要使環(huán)境中的殘留的甲醛濃度盡可能低至不致使人嗅出特殊氣味(<0.55*10-6>,并對眼睛無刺激(<1*10-6>,然后根據(jù)測定的室內(nèi)環(huán)境中甲醛殘留量的結果,正確設定換氣時間,以保證在達到作業(yè)環(huán)境中無菌的前提下,對人身心健康不致產(chǎn)生不良影響。

1 取樣方法及取樣量

在各取樣場所,用約30L的塑料袋收集室內(nèi)空氣,將袋內(nèi)空氣用吸收瓶、泵、氣流計等組成的裝置捕集至瓶內(nèi)吸收液中(樣本數(shù)應≧3)。

2 供試液的配制

0.5%硼酸溶液20ml作為吸收液,用溶液吸收法,以1L/min的速度分別讓各取樣場所的空氣通過10min,然后將吸收液移至25.0ml的容量瓶中,加水使成25.0ml,即得。

3 試驗操作

A:取供試液2.0ml至帶栓試管中,加5mol/LNaOH溶液2.0mlAHMT溶液2.0ml,輕搖數(shù)次混勻后,室溫放置20min。然后加KIO4溶液2.0ml,搖2~5min至無氣流生成為止;同時用水2.0ml同法制成對照液,在波長550nm附近測zui大吸光度。

B:分別取甲醛標準液0、0.5、1.0、1.52.0ml,加水使成2.0ml,然后按A操作,測定吸光度,制出甲醛濃度(ug/ml)與吸光度的關系檢量線。

環(huán)境中的甲醛濃度(10-6)可由下式求出:

22.4 273+t

甲醛濃度(10-6=aX-------------X25X---------

30.03 273V

式中 a------供試液中甲醛濃度,

V-----采樣氣體量,L

t-----采樣時平均溫度,℃

224-----1mol氣體在0、1個大氣壓(101.325kPa)下的體積,L;

3003---- 甲醛相對分子質量;

25-----供試液全量,ml。

4 試液準備

A:甲醛標準液

a甲醛稀釋液:精取中國藥典中規(guī)定“甲醛溶液”1ml,加水準確至200 ml作為甲醛稀釋液.精取10ml至碘瓶內(nèi),確加入0.1mol/L碘液50ml,加1mol/L氫氧化鋰溶液20ml。避光放置15min后,加15ml10%硫酸,用硫代硫酸鈉液(0.1mol/L)滴定。另用水10ml進行空白試驗。

Va-VbX1.5013

甲醛稀釋液中的甲醛濃度(mg/ml=------------------------------------

10

式中Va------甲醛稀釋液消耗0.1mol/L硫代硫酸鈉液量,ml;

Vb------空白試驗消耗0.1mol/L硫代硫酸鈉液量,ml;

1.5013------1ml碘液(0.1mol/L)相對甲醛的量,mg;

10-------甲醛稀釋液取樣量,ml。

b:甲醛標準液:精取甲醛稀釋液,加水準確稀釋1000倍,即得。

BAHMT溶液

4-氨基-3--5-巰基-1,24-三唑0.5g,加0.2mol/L鹽酸100ml溶解,避光保存。需要說明的是,用甲醛消毒時也有不加高錳酸鉀,而將甲醛直接放入空調(diào)器內(nèi)送入房間及用氨水中和的方法。不管采用什么方法,只要經(jīng)過驗證是可行的,都可以使用。

關鍵詞:潔凈室、甲醛氣體、熏蒸消毒

問:細菌室工作守則(微生物室SOP之一)是什么?

答:細菌室工作守則 1.每日工作前用紫外線照射實驗室半小時以上。 2.入室前應穿工作服,并做好實驗前的各項準備工作。 3.實驗室內(nèi)應保持肅靜,不準吸煙、吃東西及用手觸摸面部。盡量減少室內(nèi)活動,以免引起風動,無關人員禁入。 4.非必要物品禁止帶入實驗室,必要資料和書籍帶入后,應遠離操作臺。 5.做好標本的登記、編號及試驗記錄。未發(fā)出報告前,請勿丟棄標本。 6.標本處理及各項試驗應在操作間進行,接種環(huán)用完后應立即火焰滅菌,沾菌吸管、玻片等用后應浸泡在消毒液內(nèi)。 7.實驗時手部污染,應立即用過氧乙酸消毒或浸于3%來蘇兒溶液中5-10分,再用肥皂洗手并沖洗干凈;如誤入口內(nèi),應立即吐出,并用1:1000高錳酸鉀溶液或3%雙氧水漱口,根據(jù)實際情況服用有關藥物。 8.實驗過程中,如污染了實驗臺或地面,應用3%來蘇兒覆蓋其上半小時,然后清洗;如污染工作服,應立即脫下,高壓滅菌。 9.若出現(xiàn)著火情況,應沉著處理,切勿慌張,立即關閉電閘,積極滅火。易燃物品(如酒精、二甲苯、乙和丙酮等)必須遠離火源,妥善保存。 10.工作結束時檢查電器、酒精燈等是否關閉,觀察記錄培養(yǎng)箱、冰箱溫度及工作情況,用浸有消毒液的抹布將操作臺擦拭干凈,并將試劑、用具等放回原處,清理臺面,未污染的廢棄物扔進污物桶,有菌廢棄物應送高壓滅菌后處理。 11.離室前工作人員應將雙手用消毒液消毒,并用肥皂和清水洗凈。 12.愛護儀器設備,經(jīng)常清潔,注意防塵和防潮。 關鍵詞:微生物室SOP

問:紫外燈管是什么玻璃材料做的?原理是什么?

答:紫外線殺菌燈基本常識 --------------------------------------------------------(彭*) ----殺菌燈實際上是屬于一種低壓汞燈。低壓汞燈是利用較低汞蒸汽壓(<10-2Pa)被激化而發(fā)出紫外光,其發(fā)光譜線主要有兩條:一條是253.7nm波長;另一條是185nm波長,這兩條都是肉眼看不見的紫外線。 ----用來照明用的日光燈、節(jié)能燈也屬于低壓汞燈,依*低壓汞蒸汽被激發(fā)后發(fā)射紫外線,其中254nm波長的紫外線照射到熒光粉上再發(fā)出可見光,如果改變熒光粉的成分和比例,它就可以發(fā)出我們通常所見的不同顏色的光。 ----殺菌燈不需要轉化為可見光,253.7nm的波長就能起到很好的殺菌作用,這是因為細胞對光波的吸收譜線有一個規(guī)律,在250~270nm的紫外線有zui大的吸收,被吸收的紫外線實際上作用于細胞遺傳物質即DNA,它起到一種光化作用,紫外光子的能量被DNA中的堿基對吸收,引起遺傳物質發(fā)生變異,使細菌當即死亡或不能繁殖后代,達到殺菌的目的。 ----日光燈和節(jié)能燈使用普通玻璃做成的,253.7nm紫外線透不出來,不能用做殺菌用的燈,石英玻璃對紫外線透過率高,達90%,是做殺菌燈的材料,但是石英玻璃的性能與普通玻璃在性能上有很大的差別(主要是熱膨脹系數(shù)不同),封接不能用普通的自動化程度較高的圓封的辦法,這使得殺菌燈生產(chǎn)制造的技術含量要高于普通節(jié)能燈。 ----有一種透紫外線的玻璃,即通常所說的高硼玻璃,它對紫外透過率約是石英玻璃的60%,它的生產(chǎn)工藝與節(jié)能燈一樣,使得它的成本與價格比石英玻璃生產(chǎn)的殺菌燈相差很遠,幾瓦的燈管只需幾元,但它在性能上遠比不上石英殺菌燈。表現(xiàn)在如下幾方面: ---- 1、透過率不同,在同樣規(guī)格經(jīng)同樣鎮(zhèn)流器測試,石英玻璃殺菌燈紫外線強度是高硼玻璃殺菌燈的1.5倍以上; ---- 2、高硼玻璃燈紫外光強度很容易衰減,它點燈數(shù)百小時后其紫外光強度就大幅下降,降到初始時的50%-70%。在用戶手上,雖然看到燈管還是亮的,但它可能已不起作用了。而石英玻璃的光衰減程度要遠小于高硼燈,如果生產(chǎn)工藝過關,石英燈的光衰減在經(jīng)點燈2000-3000小時,光衰減到初始時的80%-70%,以后只要燈不滅,光衰的幅度會越來越小。 ----國內(nèi)殺菌燈的客戶可能會了解菲利浦的殺菌燈,菲利浦有一種殺菌燈是用一種接近普通玻璃的玻璃生產(chǎn)的,而非石英玻璃制造的,其透光率接近石英玻璃的透過率,比中國的高硼玻璃燈要高得多,可使用自動化程度較高的節(jié)能燈生產(chǎn)工藝生產(chǎn),這種燈主要依*他們煉制這種玻璃的技術。它的缺點是不能產(chǎn)生臭氧。 ----石英殺菌燈的另一個特點是可發(fā)出臭氧。由于石英玻璃對短波185nm的紫外線透過率也高,185nm的紫外線能電離空氣產(chǎn)生臭氧,臭氧濃度高對人體不利,但在無人場合時能使用,臭氧也能殺菌、消毒,恰好可彌補由于紫外線只沿直線傳播、消毒有死角的缺點。 ----有些場合不能有臭氧,也可使用石英殺菌燈,這種石英玻璃在煉制的時候就加了一種元素--鈦(Ti),使它透過紫外線在200nm以下發(fā)生截止,而對254nm紫外線透過基本無影響,即通常所說的無臭氧殺菌燈。 ----從以上分析,做殺菌燈用石英玻璃是選擇。在國內(nèi),醫(yī)療衛(wèi)生領域,早已不推薦使用高硼殺菌燈,在美國、加拿大、日本生產(chǎn)紫外線殺菌燈普遍都采用石英玻璃。原理:現(xiàn)代紫外消毒技術是基于現(xiàn)代防疫學、光學、數(shù)學、生物學及物理化學的基礎上,利用特殊設計的率、高強度和長壽命的C波段紫外光發(fā)生裝置產(chǎn)生的強紫外C光照射流水、空氣或固體表面,當水、空氣或固體表面中的各種細菌、病毒、寄生蟲、水藻以及其他病原體受到一定劑量的紫外C光輻射后,其細胞中的DNA結構受到破壞(鍵斷裂,或光化學反應,如使DNATHYMINE二聚等),從而在不使用任何化學藥物的情況下殺滅細菌、病毒以及其它致病體。達到了消毒和凈化的目的。

關鍵詞:紫外燈管

:直接接種法和薄膜過濾法的區(qū)別

:直接接種法取樣量少,方法繁瑣,且易受外源性細菌污染,對操作者和操作環(huán)境要求高,對實驗結果的可*性影響較大。薄膜過濾法采用大取樣量集菌的方法,具有代表性,不易漏檢,儀器操作簡單。該系統(tǒng)是全封閉過濾系統(tǒng),避免了操作過程中外源性細菌的污染,對實驗結果的可*性影響較小。薄膜過濾法的缺限是集菌儀的價格較高,一次性使用的集菌培養(yǎng)器也是一項支出,所以較直接接種法而言,花費的成本要高。相對產(chǎn)品質量而言,增加這點投入也是應該的。

關鍵詞:直接接種法 薄膜過濾法 區(qū)別

:05版藥典關于微生物限度檢查驗證方法中提到驗證試驗至少應進行3次“獨立的平行試驗”。請問應該如何理解“獨立的平行試驗”?什么樣的情況算是“獨立平行”呢?如果設計3次試驗,試驗時間能否重疊?試驗條件能否共用?

:時間可以重疊,試驗條件也可以共用.先做一次獨立的試驗,然后后面兩次跟*次一樣. (1)試驗組:取樣品加入xxx ml稀釋液中,混勻制成供試液,取供試液1ml1ml50 100cfu試驗菌,注入無菌平皿中,做2個平行。(2)菌液組:取1ml試驗菌注入無菌平皿中,做2個平行,測定所加的試驗菌數(shù)。(3)供試品對照組:取1ml供試液注入無菌平皿中,做2個平行,測定供試品本底菌數(shù)。(4)傾注已融化并冷卻至45℃左右的xxx培養(yǎng)基于以上平皿中,待凝固后,倒置于xxxx℃培養(yǎng) xxxh,計數(shù)。(5)試驗重復3次。

關鍵詞:獨立的平行試驗 微生物限度檢查驗證

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